蛋白纯化步骤(蛋白质纯化方法及原理)

蛋白纯化步骤(蛋白质纯化方法及原理)

小编了解到很多人查询关于【蛋白纯化步骤】的问题，所以整理了以下答案，看完一定会对你有所帮助。

全文摘要：

(1)蛋白质纯化方法及原理

(2)蛋白质纯化方法，有知道的吗？

(3)蛋白质分离纯化的5种方法主要有什么?

一、蛋白质纯化方法及原理

原理：不同蛋白质具有不同的等电点，当蛋白质混合物调到其中一种蛋白质的等电点时，这种蛋白质大部分和全部被沉淀下来。

将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中，利用磁力搅拌器。常用的半透膜：玻璃纸、火棉和其他材料合成。

当不同分子大小的蛋白质混合物流进凝胶层析柱时，比凝胶网孔大的分子不能进入珠内网状结构，排阻在凝胶珠以外，在凝胶珠缝隙间隙中向下移动。而比孔小的分子不同程度地进入凝胶珠内，这样由于不同大小分子所经历的路径不同而到分离。

二、蛋白质纯化方法，有知道的吗？

实验室常用的蛋白纯化方法不得不说赛多利斯家的层析法。它们是根据目标分子与其它杂质性质的不同采用离子交换、疏水、亲和等不同的纯化策略。选择相应的纯化策略即选择带有不同配基的层析柱。除了配基不同之外，连接不同配基的基质也不尽相同。因此层析又有膜层析、树脂层析、凝胶层析等。

三、蛋白质分离纯化的5种方法主要有什么?

蛋白质分离纯化常用方法有：

1、沉淀,

2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动.根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等.

3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法.

4、层析：

a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离.如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来.

b.分子筛,又称凝胶过滤.小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出.

5、超速离心：既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量.不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开.